Méthode d’essai classique :

Mouse LD50 Assay for Botulinum Toxin Potency Testing

[essai de DL50 chez la souris comme épreuve de puissance pour les toxines botuliniques]

Méthodes de rechange pour les essais :

Titre et description :

Mouse Hind-Limb assay (Digital Abduction Score (DAS) Assay)
[essai sur membre pelvien chez la souris (essai par manoeuvre d'abduction des articulations digitales mesurée par pointage)]

Diverses dilutions de la toxine sont injectées dans le muscle gastronémien de la patte postérieure droite de souris. Le niveau de paralysie est évalué au cours d'une période d'observation de 12 jours.

Validation :

É.-U. : le groupe de travail de l'ICCVAM, formé de spécialistes, a conclu que cet essai (DAS assay) peut être appliqué à de nombreux sérotypes ou produits et peut s'avérer une méthode d'essai de puissance, pourvu que son utilisation soit faite en fonction de mesures établies par un étalon de référence (soit une préparation standardisée et étalonnée de BoNT à partir de laquelle des valeurs « relatives » de puissance sont définies). Des études supplémentaires de validation ont été recommandées (2008).

Statut réglementaire :

UE : figure dans la Pharmacopée européenne (2005)

É.-U. : aucun

Incidence, possible ou réelle, sur l’utilisation d’animaux d’expérimentation :
Raffinement (point limite non létal)
Références :
  • Adler S., Bicker G., Bigalke H., Bishop C., Blümel J., Dressler D., Fitzgerald J., Gessler F., Heuschen H., Kegel B., Luch A., Milne C., Pickett A., Ratsch H., Ruhdel I., Sesardic D., Stephens M., Stiens G., Thornton P.D., Thürmer R., Vey M., Spielmann H., Grune B. et Liebsch M. (2010) The current scientific and legal status of alternative methods to the LD50 test for Botulinum neurotoxin potency testing. ATLA 38(4):315-330.
  • ICCVAM (2008) Report on the ICCVAM-NICEATM/ECVAM Scientific Workshop on Alternative Methods to Refine, Reduce or Replace the Mouse LD50 Assay for Botulinum Toxin Testing. Bethesda MD: National Institutes of Health (NIH).
  • Pearce L.B., Borodic G.E., First E.R. et MacCallum R. (1994) Measurement of botulinum toxin activity: evaluation of the lethality assay. Toxicology & Applied Pharmacology 128(1):69-77.
  • Pearce L.B., Borodic G.E., Johnson E.A., First E.R. et MacCallum R. (1995) The median paralysis unit : a more pharmacologically relevant unit of biologic activity for botulinum toxin. Toxicon 33(2):217-227.
  • Pearce L.B., First E.R. et Borodic G.E. (1995) Botulinum toxin: Death versus localized denervation. Journal of the Royal Society of Medicine 88(4):239-240.
  • Sesardic D., Leung T. et Gaines Das R. (2003) Role for standards in assays of botulinum toxins: international collaborative study of three preparations of botulinum type A toxin. Biologicals 31(4):265-276.
Dernière révision :
mai 2012